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要根據(jù)實際情況選擇適合的細胞凋亡檢測方法

細胞凋亡（apoptosis）是一種在多細胞生物體中發(fā)生的程序性細胞死亡形式，屬于細胞的正常生理過程，在生物體進化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及發(fā)育過程中起著重要作用，具有重要生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機制。在生物學(xué)研究過程中常常需要檢測細胞凋亡情況。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細胞凋亡的方法，大致可分為基于細胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標記三大類。每一方法都有其優(yōu)缺點，需要根據(jù)實際情況選擇適合的細胞凋亡檢測方法。1、電子顯微鏡檢測方法在透射電鏡下，凋亡細胞體積變小。凋亡Ⅰ期（pro-apopto...

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充質(zhì)干細胞都具有哪些基本特性？

充質(zhì)干細胞是組織的建造者和功能維持者：在組織形態(tài)發(fā)生中負責(zé)搭建腳手架，分化出骨骼、軟骨、脂肪、纖維等結(jié)締組織，構(gòu)成器官發(fā)育框架結(jié)構(gòu)；而且，間充質(zhì)干細胞可以分泌數(shù)十種因子，為各種分化細胞提供所需營養(yǎng)。其基本特性包括：1、強大的增殖能力和多向分化潛能：在適宜的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肌細胞、神經(jīng)細胞、肝細胞、內(nèi)皮細胞、基質(zhì)細胞等多種細胞的能力。2、免疫調(diào)節(jié)功能：通過細胞間的相互作用及產(chǎn)生細胞因子干擾樹突狀細胞功能并抑制T細胞的增殖及其免疫反應(yīng)，從而發(fā)揮...

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耐藥細胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？

耐藥細胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法，誘導(dǎo)腫瘤細胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性，從而建立相應(yīng)的耐藥細胞系。細胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？1、在體外，低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生耐藥性。2、藥物對親代細胞和耐藥細胞的IC50用2。MTT法，計算耐藥指數(shù)。目前已知的體外建立耐藥細胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中，常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細胞化療耐藥模型。...

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工具細胞株具有高轉(zhuǎn)染率、實驗周期短的特點

細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株，是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸，引起細胞本身生物化學(xué)過程的改變，細胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細胞逐漸對藥物耐受。工具...

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標記細胞株的分離和培養(yǎng)要注意些什么？

標記細胞株是細胞系中特定標簽（Luc、GFP、RFP等）的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移，該細胞系可用作示蹤細胞，為細胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標記細胞株的分離和培養(yǎng)：1、在無菌條件下，取出1-3DSD大鼠的心房組織，然后用PBS清洗組織塊兩次，然后將組織切成1mm3左右；2、在組織塊中加入4ml酶消化液（0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶），懸停10s，37℃消化10min，然后用滴定管吹成單細胞懸液，自然沉淀收集取上清，用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃；3、剩余組織加入3～4m...

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細胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法要怎么操作？

凋亡或者說程序性細胞死亡，是細胞內(nèi)建的防御機制之一，在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常，會導(dǎo)致多種疾病，包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細胞凋亡的方法，從大框架上講，可以劃分為基于細胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標記三大類。那么細胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法是怎么操作的呢？1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個細胞形態(tài)學(xué)概念。因此，鑒定凋亡的金指標，往往是基于形態(tài)學(xué)的。凋亡和另外一種主要的細胞死亡類型“壞死”有著顯著的亞細胞形態(tài)差異。簡而言之，在透射電鏡下，凋亡...

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細胞培養(yǎng)常見問題和解答

在制藥行業(yè)，細胞培養(yǎng)已成為抗體生產(chǎn)的重要組成部分。細胞培養(yǎng)技術(shù)已被用于生產(chǎn)針對輪狀病毒、脊髓灰質(zhì)炎、天花、肝炎、風(fēng)疹和水痘的抗體。基于細胞的流感抗體也已獲準在美國和許多歐洲國家使用。那么細胞培養(yǎng)的前景如何？3D細胞培養(yǎng)出于多種原因，對2D細胞培養(yǎng)的需求正在增加。2D細胞培養(yǎng)方法包括在平面上將細胞培養(yǎng)成2D單層。二維貼壁細胞培養(yǎng)從根本上限制了細胞的產(chǎn)生。研究人員提出了3D細胞培養(yǎng)來解決這些問題。這些培養(yǎng)物已被證明在一些基本生物學(xué)機制的研究中是有效的，例如細胞數(shù)量監(jiān)測、細胞活力、...

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細胞凋亡檢測的常用檢測方法有這幾種

要了解細胞凋亡檢測方法，首先要了解細胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化，形態(tài)學(xué)觀察表明細胞凋亡的變化是多階段的。細胞凋亡往往涉及多個細胞，甚至少數(shù)細胞也異步發(fā)生。首先細胞體積縮小，連接消失，與周圍細胞分離，然后細胞質(zhì)密度增加，隨后會發(fā)生一系列變化：線粒體膜電位消失；滲透率變化；將細胞c釋放到細胞質(zhì)中；核質(zhì)濃度、核膜和核仁碎裂；DNA被降解成180bp-200bp左右的片段，在細胞膜內(nèi)形成囊泡；絲氨酸膜表面轉(zhuǎn)向磷脂膜內(nèi)側(cè)；細胞膜結(jié)構(gòu)仍然完好無損。可以將凋亡細胞的殘骸分割包裹成若干個凋亡小體而不...

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